NITROFORINAS SALIVARES DE RHODNIUS PROLIXUS (HEMIPTERA: REDUVIIDAE): AVALIAÇÃO DO RNAI PARENTAL
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Os triatomíneos são insetos com expressiva importância epidemiológica, já que muitas de suas espécies são vetoras do Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas, endêmica em muitas regiões das Américas. A capacidade vetorial desses insetos está diretamente relacionada à sua eficiência alimentar, que por sua vez depende de fatores relacionados à fisiologia do hospedeiro, características do aparato alimentar do insetos e biomoléculas salivares. Os triatomíneos apresentam uma gama de proteínas salivares e intestinais que interferem na hemostasia e nas respostas inflamatória e imune do hospedeiro, auxiliando no repasto sanguíneo. Neste cenário, destacam-se as nitroforinas (NPs). Tratam-se de hemeproteínas descritas na saliva de Rhodnius prolixus, com capacidade de armazenar e liberar óxido nítrico nos tecidos do hospedeiro durante a fase de sondagem e ingestão de sangue, sendo responsáveis pelas atividades vasodilatadoras, antiagregação plaquetária e ação anti-histamínica . A técnica de interferência de RNA tem permitido estudos in vivo da função gênica em organismos não-modelos, como insetos vetores de doenças. Recentemente, nosso grupo de pesquisa mostrou a ocorrência de RNAi parental em Rhodnius prolixus. Assim, tentando otimizar o uso de RNAi em estudos de função gênica de triatomíneos, o presente trabalho tem como objetivo avaliar a transmissão vertical do silenciamento induzido por RNA interferente (RNAi parental) em Rhodnius prolixus utilizando as nitroforinas salivares como marcadoras. Para tanto, 25 casais montados a partir de insetos silenciados para nitroforinas, enquanto 5 o estádio foram monitorados. O fenótipo de seus descendentes foi avaliado através do caráter fenotípico da coloração de suas glândulas por dissecção, associado à quantificação de hemeproteína salivar por espectrofometria. Resultados parciais tem demonstrado a manutenção do silenciamento em ninfas de 1 o , 2 o , 3 o , 4 o e 5 o estádios e adultos da geração F1. A mesma metodologia está sendo adotada para insetos da geração F2. Esperamos que nossos resultados possam validar uma ferramenta importante em estudos de genômica funcional de insetos. |