AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMALÁRICA DE COMPOSTOS INIBIDORES DE QUINASES IDENTIFICADOS POR TRIAGEM VIRTUAL SOBRE ESTÁGIOS ASSEXUADOS DE PLASMODIUM VIVAX |
Malária causada por Plasmodium vivax é a forma da doença mais amplamente distribuída no mundo. O Brasil é líder de casos de malária nas Américas, sendo 99,5% destes reportados na região da Amazônia Legal e, atualmente, mais de 85% dos casos no Brasil são por P. vivax . Dentre os principais desafios de se combater esta doença, está a resistência do parasita aos medicamentos antimaláricos, ressaltando a importância do estudo de novos antimaláricos. Tradicionalmente, as quinases têm sido alvos para descoberta de novos fármacos, devido ao seu envolvimento em diversos processos celulares, além da sua potencial especificidade contra o parasito. Nesse estudo avaliamos a atividade antimalárica contra isolados de P. vivax de substâncias identificadas por meio de estratégias de quimiogenômica e bioinformática, cujos alvos preditos eram quinases do parasita. Para determinar a atividade antimalárica dessas substâncias, foram coletadas amostras de sangue de pacientes na Fundação de Medicina Tropical Dr. Heitor Vieira Dourado. O sangue foi processado para a remoção de leucócitos e então ressuspenso em meio McCoy5A contendo 20% de Soro AB (hematócrito 2%). Para avaliar a atividade antimalárica, o parasita na presença ou não de diferentes concentrações das drogas foi incubado por até 48h a 37 o C em atmosfera hipóxica. Foram então confeccionadas gotas espessas de cada poço que foram coradas com Giemsa e foi determinado o número de esquizontes em 200 parasitas assexuados. A IC 50 das drogas foi determinada com o auxílio do software ICEstimator. Seis substâncias foram avaliadas, sendo que 4 destas foram selecionadas através de estratégias quimiogenômicas focadas em quinases e as outras 2 em outros alvos. Todas as substâncias testadas inibiram o amadurecimento dos estágios assexuados de P. vivax , sendo as IC 50 (nM + DP) encontradas: 13 (34,95 ± 29,14), 18 (57,33 ± 31,99) 19 (64,17 ± 50,45) 33 (49,47 ± 47,75), 35 (21,11 ± 11,58) e EPI (14,76 ± 5,04). Importante, o índice de seletividade das substâncias foi determinado através da avaliação da citotoxicidade destas em células COS7 e as drogas avaliadas apresentaram índice de seletividade maiores que 57,61 o que demonstra a ação seletiva destas contra o parasita. Desta maneira mostramos que a triagem de compostos através de quimiogenômica parece ser uma abordagem eficaz na seleção de compostos com efeito antimalárico. |