Caracterização morfo-funcional de vesículas de membrana (VMs) liberadas de macrófagos infectados pelo Mycobacterium bovis BCG
ELISSANDRO MIRANDA MARTINS1, SILAS GABRIEL SOUZA DE OLIVEIRA1, PAULO SÉRGIO DE MORAIS DA SILVEIRA MATTOS1, CLARISSA CUNHA SANTANA1, YASMIM DA SILVA DE AZEVEDO OLIVEIRA1, TONYA AZEVEDO DUARTE1, ANDRÉ CRONEMBERGER ANDRADE1, ANA CLAUDIA TROCOLI TORRECILHAS1, BRUNO SOLANO DE FREITAS SOUZA1, LEONARDO PAIVA FARIAS1, JULIANA PERRONE BEZERRA DE MENEZES1, CLÁUDIO PEREIRA FIGUEIRA1, BRUNO DE BEZERRIL ANDRADE1, THEOLIS COSTA BARBOSA BESSA 1
1. FIOCRUZ BA - Fundação Oswaldo Cruz Bahia, 2. UFBA - Universidade Federal da Bahia, 3. UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo, 4. REDE TB - Rede Brasileira de Pesquisa em Tuberculose
theolis@bahia.fiocruz.br

Vesículas de membrana (VMs), também chamadas vesículas extracelulares, são estruturas envolvidas por membrana lipídica que podem conter componentes citoplasmáticos como proteínas e ácidos nucléicos. Elas são encontradas em fluidos biológicos como plasma e soro, e são liberadas por vários tipos celulares. Sua liberação e conteúdo variam conforme o estado da célula. Por exemplo, macrófagos infectados por Mycobacterium spp. induzem a sua produção. As VMs vêm sendo consideradas como uma das principais vias de comunicação intercelular, em conjunto com fatores de crescimento, citocinas, nucleotídeos, lipídios, NO 2 e moléculas de adesão, e são capazes de modular respostas imunes. Estudos preliminares sugerem que as VMs derivadas de macrófagos infectados exibem atividade pró-inflamatória e podem modular a migração de outras células para o foco da inflamação. Buscamos caracterizar morfo-funcionalmente as VMs derivadas de macrófagos infectados com M. bovis BCG (BCG). Essas VMs foram obtidas a partir de culturas de macrófagos derivados de monócitos humanos provenientes do sangue periférico ( buffy coats) de doadores saudáveis, infectadas ou não com BCG. Como controle, foram caracterizadas as VMs obtidas do plasma humano. A caracterização morfológica por microscopia eletrônica de transmissão (MET), e a análise de rastreamento de nanopartículas (NTA) quanto a tamanho e concentração, sugerem que as VMs obtidas têm tamanho e formato compatíveis com a literatura, sendo maior a concentração de VMs obtidas a partir do plasma. Não foram encontrados níveis detectáveis de TNF ou IL-10 nas VMs. Nas VMs obtidas do plasma, foram observados níveis detectáveis apenas de IL-1beta. Destacam-se os níveis bastante aumentados de IL-8 e IL-6 nas VMs obtidas a partir de culturas de macrófagos infectados com BCG. Estão previstas a caracterização de moléculas de superfície e intravesiculares, bem como a análise da atividade imunomodulatória e anti-micobacteriana das VMs obtidas.



Palavras-chaves:  Bacilo de Calmette-Guérin, Imunomodulação, In vitro, Tuberculose, Vesículas extracelulares