Caracterização morfo-funcional de vesículas de membrana (VMs) liberadas de macrófagos infectados pelo Mycobacterium bovis BCG |
Vesículas de membrana (VMs), também chamadas vesículas extracelulares, são estruturas envolvidas por membrana lipídica que podem conter componentes citoplasmáticos como proteínas e ácidos nucléicos. Elas são encontradas em fluidos biológicos como plasma e soro, e são liberadas por vários tipos celulares. Sua liberação e conteúdo variam conforme o estado da célula. Por exemplo, macrófagos infectados por Mycobacterium spp. induzem a sua produção. As VMs vêm sendo consideradas como uma das principais vias de comunicação intercelular, em conjunto com fatores de crescimento, citocinas, nucleotídeos, lipídios, NO 2 e moléculas de adesão, e são capazes de modular respostas imunes. Estudos preliminares sugerem que as VMs derivadas de macrófagos infectados exibem atividade pró-inflamatória e podem modular a migração de outras células para o foco da inflamação. Buscamos caracterizar morfo-funcionalmente as VMs derivadas de macrófagos infectados com M. bovis BCG (BCG). Essas VMs foram obtidas a partir de culturas de macrófagos derivados de monócitos humanos provenientes do sangue periférico ( buffy coats) de doadores saudáveis, infectadas ou não com BCG. Como controle, foram caracterizadas as VMs obtidas do plasma humano. A caracterização morfológica por microscopia eletrônica de transmissão (MET), e a análise de rastreamento de nanopartículas (NTA) quanto a tamanho e concentração, sugerem que as VMs obtidas têm tamanho e formato compatíveis com a literatura, sendo maior a concentração de VMs obtidas a partir do plasma. Não foram encontrados níveis detectáveis de TNF ou IL-10 nas VMs. Nas VMs obtidas do plasma, foram observados níveis detectáveis apenas de IL-1beta. Destacam-se os níveis bastante aumentados de IL-8 e IL-6 nas VMs obtidas a partir de culturas de macrófagos infectados com BCG. Estão previstas a caracterização de moléculas de superfície e intravesiculares, bem como a análise da atividade imunomodulatória e anti-micobacteriana das VMs obtidas. |