DESENVOLVIMENTO DE TESTE IMUNOSSOROLÓGICO BASEADO EM NANOBIOSSENSORES PARA DETECÇÃO DA HEPATITE B |
A hepatite B constitui um relevante problema de saúde pública global. O vírus hepatotrópico perfaz uma prevalência de 3,5% na população mundial. Embora o Brasil seja considerado uma região de baixa endemicidade, existe o risco de transmissão em transfusões além do potencial de cronificação e mortalidade. A principal detecção do VHB é feita por imunoensaios e testes moleculares. Logo, os imunossensores eletroquímicos tem despertado o interesse como importantes sistemas analíticos devido à rápida resposta, seletividade, miniaturização, portabilidade e baixo custo. A incorporação de nanomateriais tem contribuído no aumento da sensibilidade e especificidade. Dentre os nanomateriais, os nanotubos de carbono vêm se destacando devido às excelentes propriedades elétricas, químicas e físicas que melhoram os processos transferência eletrônica e aumentam a quantidade de material imobilizado. Em associação a estes, a utilização de matrizes poliméricas para construção de plataformas sensoras nanoestruturadas tem gerado novas possibilidades para exploração das propriedades mecânicas e elétricas. Este trabalho pretendeu desenvolver protótipos biossensores como imunoensaios eletroquímicos. Para isso, eletrodos de carbono vítreo foram modificados com nanotubos de carbono e pirrol para suporte de antígenos HBcAg. O método de polimerização em fase a vapor foi adotado para síntese de um filme de polipirrol uniforme altamente condutivo. Os eletrodos foram submetidos à prova analítica contra anticorpos Anti-HBc. A interação antígeno-anticorpo foi monitorada utilizando variações de corrente. As etapas de modificações da superfície sensora foram acompanhadas pela técnica de voltametria cíclica em solução de KCl contendo a sonda ferri/ferrocianeto de potássio. Assim, observou-se um par de picos bem definidos correspondentes às formas oxidadas e reduzidas dos íons de ferro exibindo um perfil faradaico predominante do eletrodo limpo. Após a deposição dos nanocompósitos de polipirrol e nanotubos, observou-se um aumento da área eletroativa pelo aumento da transferência de carga. A imobilização do HBcAg foi confirmada pela redução dos picos redox conferido pela natureza isolante da molécula biológica. A formação dos imunocomplexos foi visualizada após uma diminuição mais acentuada do perfil capacitivo. Os resultados mostraram-se promissores para um futuro imunossensor eletroquímico de detecção do soromarcador Anti-HBc a fim de um dia se consolidar numa pré-triagem de doações de sangue. |