ANÁLISE EXPERIMENTAL IN VITRO DA EFICÁCIA DA ASSOCIAÇÃO PENTAMIDINA - VERAPAMIL EM LINHAGENS SUSCETÍVEIS E RESISTENTES DE LEISHMANIA (LEISHMANIA) AMAZONENSIS
|
A Leishmaniose Cutânea (LC) é uma protozoose causada por parasitas do gênero Leishmania. Forma clínica mais branda entre as Leishmanioses, é amplamente distribuída geograficamente afetando 87 países, sendo endêmica em 18 países da América do Sul, como Brasil. Uma das espécies causadoras da LC no Brasil é a Leishmania ( Leishmania) amazonensis (La) . Essa espécie também está associada à forma mais grave da doença, conhecida como Leishmaniose Cutânea Difusa (LCD), caracterizada pela ausência de resposta imune eficaz e proliferação exacerbada dos parasitas. Pentamidina (PMD) é uma diamina aromática, empregada no tratamento de LC nas Américas, restrita a casos específicos de LC causada por Leishmania (Viannia) guyanensis e LCD causada por La. Trabalhos anteriores do nosso grupo demonstraram que PMD associada ao bloqueador de canais de cálcio Verapamil (VERA), apresentava uma maior atividade antiparasitária, além de ser capaz de reverter o fenótipo de resistência em linhagens de La resistentes a PMD. Desta forma, propomos neste trabalho verificar a eficácia da interação PMD-VERA por isobolograma. Inicialmente, analisamos individualmente a citotoxicidade de ambos, PMD e VERA, em culturas de promastigotas de linhagens selvagens e resistentes à PMD por MTT, e observamos que baixas concentrações de PMD (< 1 µM) foram suficientes para eliminar mais de 50% dos parasitas após 24h de incubação. Enquanto que com VERA não verificamos ação antiparasitária. Por outro lado, em culturas de amastigotas intracelulares em Macrófagos Derivados de Medula Óssea (MDMO) a PMD foi eficiente em baixas concentrações (< 2,5µM) apenas em 120 horas de cultura, sendo que acima dessas condições passa a ser tóxica para as células hospedeiras. Análises prévias da eficácia da interação da PMD-VERA em MDMO infectados mostraram que baixas concentrações dos fármacos em associação apresentaram pouca toxicidade às células hospedeiras e maior eficácia na diminuição do número de células infectadas, bem como no número de parasita por células. |