INEFICÁCIA DO DNA BARCODING PARA IDENTIFICAÇÃO DE ESPÉCIES DE FLEBOTOMÍNEOS DO SUBGÊNERO Evandromyia (Aldamyia) (MANGABEIRA, 1941)
BRUNO LEITE RODRIGUES 1, LUÍS FERNANDO CARVALHO COSTA1, JOSÉ MANUEL MACÁRIO REBÊLO1, ISRAEL DE SOUZA PINTO1, PALOMA HELENA FERNANDES SHIMABUKURO1
1. IRR - Instituto René Rachou - Fiocruz Minas, 2. UFES - Universidade Federal do Espírito Santo, 3. UFMA - Universidade Federal do Maranhão
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Os flebotomíneos (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) são insetos de interesse para a saúde pública por serem os vetores biológicos de Leishmania , agentes etiológicos de leishmanioses. O controle efetivo dessas doenças é baseado no monitoramento entomológico, no qual os flebotomíneos devem ser identificados corretamente ao nível de espécie. Apesar da relevância da taxonomia desses insetos, muitas dificuldades (i.e. necessidade de preparo em lâmina, tamanho pequeno dos insetos, dificuldade de observação de estruturas morfológicas, perda de estruturas de importância taxonômica) ocasionam erros na identificação morfológica, levando a necessidade de metodologias alternativas para a taxonomia do grupo, como por exemplo, as ferramentas moleculares. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar o uso do “DNA Barcoding ” na identificação de espécies do subgênero Evandromyia ( Aldamyia ). Para essa análise, foram obtidas 37 sequências do gene mitocondrial (mtDNA) citocromo c oxidase I ( COI ) das espécies E. lenti , E. evandroi e E. piperiformis coletadas em diversas localidades do Brasil, combinadas com duas sequências de E. carmelinoi e uma de E. lenti disponíveis no GenBank. As sequências foram editadas e as distâncias genéticas K2P foram calculadas para formação de uma árvore de Neighbor-joining (NJ). Para identificação molecular foi utilizado o algoritmo ABGD, que particiona as sequências em grupos hipotéticos (i.e. espécies). Não houve diferenciação genética entre E. lenti , E. evandroi e E. carmelinoi , já que a distância genética (K2P) interespecífica não ultrapassou 3%, e não houve formação de clados distintos na árvore de NJ, com exceção de E. piperiformis . Além disso, houve a formação de uma única Unidade Taxonômica Operacional (OTU) pelo algoritmo ABGD para as quatro espécies analisadas, indicando a ineficácia desse marcador para a taxonomia molecular dessas espécies. Esse padrão de divergência molecular pode estar atrelado a origem do marcador utilizado (mtDNA), que é mais suscetível a eventos de introgressão entre espécies. Para avaliar as possíveis causas dos resultados encontrados, estudos posteriores serão direcionados para a amplificação de alvos de origem nuclear (gDNA), e detecção de bactérias endossimbiontes (e.g. Wolbachia ) que possam ocasionar a dispersão rápida e disseminada de haplótipos mitocondriais entre essas espécies.



Palavras-chaves:  DNA Barcoding, taxonomia molecular, flebotomíneos, COI