QUANTIFICAÇÃO DO mRNA DO GENE HSP70 DE LEISHMANIA INFANTUM NO SANGUE DE PACIENTES COM LEISHMANIOSE VISCERAL |
A Leishmaniose Visceral (LV), ou calazar, é causada pelo protozoário das espécies Leishmania donovani e L. infantum , que provocam uma das mais mortais doenças tropicais. A presença de transcritos de RNA vem demonstrando ser um bom biomarcador e campo promissor para a pesquisa de parasitas viáveis em amostras biológicas. Devido à labilidade e rápida degradação, a quantidade de RNA de parasitas circulantes em sangue periférico do hospedeiro pode ser uma estimativa da parasitemia e um preditor de infecciosidade. Objetivou-se descrever a presença de RNA de L. infantum em sistema de PCR quantitativa (qPCR) . As reações foram realizadas em amostras de sangue de 79 pacientes com calazar admitidos em um hospital de referência em Teresina, Brasil. Foram extraídos o RNA e DNA das amostras do creme leucocitário do sangue para posterior quantificação. Para amplificar RNA, após a exposição à transcriptase reversa foi utilizado um par de primers para o gene HSP70, usando o sistema SYBR Green. Para o DNA foi usado um par de primers para o DNA do cinetoplasto, usando o sistema Taqman. Foram aplicados testes estatísticos não-paramétricos. A correlação entre RNA e DNA foi significativa (p = 0.03; rho 0.23) . A mediana da estimativa de parasitemia para o RNA foi de 32,5 parasitas/mL e para o DNA a foi de 1380 parasitas/mL. A parasitemia estimada não se mostrou associadaao à idade, gênero, infecção pelo HIV, gravidade do quadro clínico ou a morte. Embora promissora, esta técnica deve ser validada para estimativa da parasitemia e para eventual substituição do xenodiagnóstico para verificação da infecciosidade de reservatórios com calazar. |