AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE BIOLÓGICA E ELUCIDAÇÃO DO ALVO MOLECULAR DE DOIS COMPOSTOS INIBIDORES DA ENZIMA 2-TRANS-ENOIL-ACP(CoA) REDUTASE EM CEPAS RESISTENTES de Mycobacterium tuberculosis |
A tuberculose humana (TB) é uma doença infectocontagiosa potencialmente mortal, que é causada principalmente pela micobactéria da espécie Mycobacterium tuberculosis . Em 2016, estima-se que 6,3 milhões de pessoas contraíram TB e que 1,3 milhões morreram em decorrência da doença. Diante desses fatos, torna-se evidente a necessidade de se buscar novos compostos com atividade antimicobacteriana, que apresentem, preferencialmente, novos mecanismos de ação e que sejam ativos contra cepas resistentes aos fármacos de primeira linha usados no tratamento atual. Os compostos que são objetos do presente estudo foram selecionados a partir de experimentos in silico de triagem virtual de diferentes estruturas químicas, usando-se a enzima 2- trans -enoil-ACP(CoA) redutase (InhA) de M. tuberculosis como alvo. Estudos posteriores mostraram que ambos compostos, aqui denominados de Labio-16 e Labio-17, foram capazes de inibir a atividade in vitro da InhA e apresentaram atividade antimicobacteriana satisfatória contra M. tuberculosis . Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade dos compostos Labio-16 e Labio-17 contra algumas cepas resistentes de M. tuberculosis , com o intuito de elucidar o seu mecanismo de ação e o alvo molecular. Para tanto, os compostos foram primeiramente testados contra oito isolados clínicos multirresistentes a fármacos (MDR) usando-se ensaios de determinação da concentração inibitória mínima (MIC). Posteriormente, avaliou-se a atividade frente a uma cepa laboratorial de M. tuberculosis que expressa uma versão mutante da enzima InhA (S94A). Por fim, testou-se a capacidade de ambos compostos em inibir a via de biossíntese dos ácidos micólicos, na qual a enzima InhA atua. Os resultados obtidos indicaram que os compostos Labio-16 e Labio-17 inibiram satisfatoriamente o crescimento de todos os isolados MDR testados (MICs < 5,0 µg/ml). Curiosamente, não foi observado aumento nos valores de MIC para a cepa que expressa a enzima InhA (S94A), indicando que essa enzima possa não ser o alvo molecular desses compostos. O tratamento de culturas de M. tuberculosis com cada uma das moléculas mostrou uma ausência de inibição da biossíntese dos ácidos micólicos, corroborando a hipótese de que o alvo dessas moléculas, de fato, não seja a enzima InhA. Novos experimentos estão sendo realizados para selecionar mutantes espontâneos dos compostos Labio-16 e Labio-17 para a identificação dos seus alvos moleculares. |