IDENTIFICAÇÃO E VALIDAÇÃO DE EPÍTOPOS PARA CÉLULAS B ESPECÍFICOS PARA Zika virus |
A infecção pelo Zika virus ( ZIKV) está relacionada com complicações neurológicas graves e, devido à co-circulação de outros arbovírus e os diferentes desfechos pelas doenças por eles causadas, além da dificuldade de diferenciar precocemente tais infecções com base apenas em seus aspectos clínicos, é crucial o desenvolvimento de um teste diagnóstico sorológico diferencial específico para a zika. Os objetivos deste projeto foram: realizar a predição de epítopos para células B a partir das sequências de ZIKV; desenhar e triar peptídeos antigênicos específicos para o ZIKV, e; testar o reconhecimento dos peptídeos produzidos. Para isso, foi feito o download de sequências sul-americanas e africanas do ZIKV e as sequências de referência dos DENV 1, 2, 3 e 4. Utilizando o preditor de epítopos para células B, foram identificados 37 epítopos na poliproteína do ZIKV e seus correspondentes na poliproteína consenso dos DENV. Os epítopos foram então analisados, in silico , quanto à sua composição de aminoácidos e as suas propriedades bioquímicas, além de estudos conformacionais. Desta forma, 20 epítopos foram utilizados para o desenho de peptídeos que foram comercialmente sintetizados e utilizados em experimentos de microarranjo proteico utilizando 41 amostras de soros de pacientes infectados pelo ZIKV ou pelo DENV, além de 10 soros de voluntários saudáveis. De forma geral, os peptídeos testados não apresentaram distinção de reconhecimento significativo pelos 3 grupos clínicos de amostras. Entretanto, 3 peptídeos de ENV, NS2-B e NS3 se destacaram por apresentarem alta intensidade de sinal e, consequentemente, maior reconhecimento pelas amostras, principalmente quando avaliado o reconhecimento destes peptídeos em relação à IgG, que foram reconhecidos com maior intensidade pelas amostras positivas para zika. Portanto, estes resultados foram motivadores para que os peptídeos sintetizados primeiramente fossem testados novamente com novas amostras. Além disso, novos peptídeos foram desenhados para a obtenção de resultados mais promissores. |