DETECÇÃO DE MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS ATRAVÉS DA TÉCNICA DE PCR EM TEMPO REAL EM AMOSTRAS BIOLÓGICAS DE PACIENTES COM TUBERCULOSE EXTRAPULMONAR |
A Tuberculose (TB) é causada pelo Mycobacterium tuberculosis (M. tb ) , quando está em sua forma extrapulmonar (TBE) a presença de poucos bacilos nas amostras proporciona limitações ao diagnóstico convencional (baciloscopia, prova tuberculínica, exames por imagem e histopatológico), além do crescimento lento do bacilo em meio de cultura específico (de 7 a 8 semanas). Para rapidez, maior precisão, reprodutibilidade e acurácia na detecção do M. tb , a aplicação da Reação em Cadeia Polimerase (PCR) em Tempo Real (qPCR) se destaca entre as técnicas moleculares. O presente estudo teve como objetivo avaliar o desempenho da PCR em Tempo Real na detecção do M. tb em amostras de sangue, urina, outros líquidos e biópsias de pacientes com TBE e “Não TB" (NTB). As amostras foram descontaminadas (urina e outros líquidos) pelo método de Petroff modificado, conservadas em solução salina 0,9% (biópsia) e passaram por separação de células sanguíneas, em seguida realizou-se a extração de DNA e a qPCR foi realizada segundo Broccolo et al 2003 . Então, este foi um estudo prospectivo, com 173 pacientes provenientes dos principais serviços de referência do SUS, do estado de Pernambuco, no período janeiro de 2016 a abril de 2018. Do total de pacientes estudados foram classificados com TBE (84 pacientes) e NTB (89 pacientes). Entre os pacientes com TBE foram identificadas as formas: pleural (20), intestinal (14), ganglionar (13), óssea (13), cutânea (4), peritoneal (4), miliar (3), renal (2), meningoencefálica (2) , geniturinário (1) e outros casos (10). Desses 84 pacientes positivos no diagnóstico final (definido por presença de critérios clínicos, epidemiológicos, exames laboratoriais e/ou resposta ao tratamento específico para M.tb ) 53 pacientes também tiveram amostras positivas através da qPCR , obtendo uma sensibilidade de 63,1% (52,4-72,6%), enquanto a especificidade foi de 86,5% (77,9-92,1%). Por tanto, os resultados obtidos demonstraram a importância da avaliação de mais de um tipo de amostra clínica coletadas do mesmo paciente com suspeita da tuberculose extrapulmonar, podendo aumentar a sensibilidade de detecção do M.tb através da qPCR, que se mostrou importante para auxiliar o diagnóstico de TBE. Além de permitir um resultado mais rápido, colaborando para um tratamento precoce, mais eficaz e assim podendo reduzir os casos de resistência às drogas antituberculosas. |