DETECÇÃO DE MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS ATRAVÉS DA TÉCNICA DE PCR EM TEMPO REAL EM AMOSTRAS BIOLÓGICAS DE PACIENTES COM TUBERCULOSE EXTRAPULMONAR
RAYSSA MARIA PASTICK JARES DA COSTA 1, ROSANA DE ALBUQUERQUE MONTENEGRO1, LUANNA DE ÂNGELIS CORREIA DE SOUSA1, DANYELE COSTA DE MELLO1, MARCELA PEREIRA SALAZAR1, ALINE DOS SANTOS PEIXOTO1, KESSIA KELLY BATISTA DA SILVA1, LARYSSA KATHLEEN MENDONÇA FERREIRA1, ANDREZA SOUZA DO NASCIMENTO1, JULIANA FIGUEIRÊDO DA COSTA LIMA SUASSUNA MONTEIRO1, HAIANA CHARIFKER SCHINDLER1
1. IAM- FIOCRUZ/PE - Instituto Aggeu Magalhães - Fundação Oswaldo Cruz/Pernambuco
raypastick@hotmail.com

A Tuberculose (TB) é causada pelo Mycobacterium tuberculosis (M. tb ) , quando está em sua forma extrapulmonar (TBE) a presença de poucos bacilos nas amostras proporciona limitações ao diagnóstico convencional (baciloscopia, prova tuberculínica, exames por imagem e histopatológico), além do crescimento lento do bacilo em meio de cultura específico (de 7 a 8 semanas). Para rapidez, maior precisão, reprodutibilidade e acurácia na detecção do M. tb , a aplicação da Reação em Cadeia Polimerase (PCR) em Tempo Real (qPCR) se destaca entre as técnicas moleculares. O presente estudo teve como objetivo avaliar o desempenho da PCR em Tempo Real na detecção do M. tb em amostras de sangue, urina, outros líquidos e biópsias de pacientes com TBE e “Não TB" (NTB). As amostras foram descontaminadas (urina e outros líquidos) pelo método de Petroff modificado, conservadas em solução salina 0,9% (biópsia) e passaram por separação de células sanguíneas, em seguida realizou-se a extração de DNA e a qPCR foi realizada segundo Broccolo et al 2003 . Então, este foi um estudo prospectivo, com 173 pacientes provenientes dos principais serviços de referência do SUS, do estado de Pernambuco, no período janeiro de 2016 a abril de 2018. Do total de pacientes estudados foram classificados com TBE (84 pacientes) e NTB (89 pacientes). Entre os pacientes com TBE foram identificadas as formas: pleural (20), intestinal (14), ganglionar (13), óssea (13), cutânea (4), peritoneal (4), miliar (3), renal (2), meningoencefálica (2) , geniturinário (1) e outros casos (10). Desses 84 pacientes positivos no diagnóstico final (definido por presença de critérios clínicos, epidemiológicos, exames laboratoriais e/ou resposta ao tratamento específico para M.tb ) 53 pacientes também tiveram amostras positivas através da qPCR , obtendo uma sensibilidade de 63,1% (52,4-72,6%), enquanto a especificidade foi de 86,5% (77,9-92,1%). Por tanto, os resultados obtidos demonstraram a importância da avaliação de mais de um tipo de amostra clínica coletadas do mesmo paciente com suspeita da tuberculose extrapulmonar, podendo aumentar a sensibilidade de detecção do M.tb através da qPCR, que se mostrou importante para auxiliar o diagnóstico de TBE. Além de permitir um resultado mais rápido, colaborando para um tratamento precoce, mais eficaz e assim podendo reduzir os casos de resistência às drogas antituberculosas.



Palavras-chaves:  Tuberculose extrapulmonar, Diagnóstico, PCR em tempo real