Pesquisa sistemática de genes com papel na transmissão de Plasmodium |
O desenvolvimento de uma vacina contra a malária é um dos maiores desafios das ciências biomédicas. O conhecimento limitado de antígenos essenciais e sua função durante o ciclo de vida do Plasmodium , o polimorfismo antigênico e a capacidade de adaptação do parasita estão entre os principais obstáculos para o desenvolvimento de vacinas. Poucos antígenos de Plasmodium entraram no pipeline de ensaios clínicos de vacina e, até agora, apenas um atingiu o nível de ensaios clínicos de fase III. Proteínas que desempenham um papel na etapa sexual do ciclo de vida do parasita são menos polimórficas, estando sob menor pressão seletiva da resposta imunológica do hospedeiro vertebrado, e podem ser propostas como alvos para as vacinas bloqueadoras da transmissão. Assim, este projeto visa o uso de genética reversa e um modelo de malária murino para procurar sistematicamente genes que desempenhem um papel na transmissão do parasita. Nessa perspectiva, com ajuda das bases de dados de transcriptoma de Plasmodium falciparum , foram selecionados 12 genes cuja transcrição é aumentada nos gametócitos, possuem peptídeo sinal e são conservados em P. berghei e P. vivax , para gerar nocautes genéticos em P. berghei ANKA e verificar sua capacidade de fertilizar e produzir oocinetos in vitro . Cada um dos clones gerados foi selecionado por resistência à pirimetamina, genotipado por PCR e fenotipado em ensaios de conversão in vitro . Até o momento, quatro dos genes de interesse foram testados. O nocaute de um dos genes estudados até agora mostrou uma diminuição na capacidade de fertilização in vitro , sugerindo um papel nos processos de ativação dos gametócitos ou egresso de gametas e fertilização. |