DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE ARBOVIROSES EM AMOSTRAS DE LÍQUIDO CEFALORRAQUIDIANO DE PACIENTES ATENDIDOS NO HOSPITAL DE CLÍNICAS DA UNICAMP COM SUSPEITA DE INFECÇÃO NEUROLÓGICA VIRAL |
Os arbovírus são vírus transmitidos para humanos e outros animais através da picada de mosquitos hematófagos infectados, que em sua maioria pertencem às famílias Flaviviridae (gênero Flavivirus ), Togaviridae (gênero Alphavirus ) e Bunyaviridae (gênero Orthobunyavirus ), que são vírus de RNA de cadeia simples. Esses vírus apresentam capacidade de acometer o sistema nervoso, provocando lesões e moléstias neurológicas. O gênero Flavivirus é representado pelos vírus Dengue (DENV1-4), vírus da encefalite de Saint Louis (SLEV), vírus Ilhéus (ILHV), vírus Rocio (ROCV), vírus causador da febre amarela (YFV) e Oeste do Nilo (WNV). Os vírus do gênero Alphavirus são representados pelos vírus da encefalite equina do leste (EEEV), encefalite equina do oeste (WEEV), encefalite equina venezuelana (VEEV), vírus Aura (AURAV) e Mayaro (MAYV); e dentre o gênero Orthobunyavirus, encontra-se o vírus Oropouche (OROV).Os objetivos deste trabalho são: - verificar a presença do RNA de arbovírus dos gêneros Alphavirus , Flavivirus e Orthobunyavirus circulantes, utilizando a reação em cadeia da polimerase/transcriptase reversa (RT-PCR) em amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) coletadas de pacientes com sintomas de síndromes neurológicas virais; - correlacionar os resultados com a clínica apresentada pelos pacientes. O estudo é do tipo estudo de coorte prospectiva. Serão incluídas amostras de LCR de 200 pacientes com sintomas de síndromes neurológicas agudas virais que foram internados nas enfermarias do HC/UNICAMP. A extração de RNA destas amostras está sendo realizada com o kit Qiagen e após, são realizadas as reações de RT-nested PCR tipo multiplex, para detecção de material genético das arboviroses mencionadas . Como resultados iniciais, realizamos a detecção de RNA de Alphavirus e Flavivirus , em 44 amostras de cDNA de pacientes com sintomas de encefalites, meningoencefalites, mielites, entre outros, e todas as amostras apresentaram resultados negativos até o momento. Os testes foram repetidos e confirmados. A padronização da detecção do OROV está em andamento. Esses dados poderão fornecer informações sobre uma provável arbovirose ainda não pesquisada e que esteja circulante na região de Campinas/SP, no período pós-surto Zika/Dengue, incluindo a necessidade da utilização de métodos de diagnóstico laboratorial rápidos e eficazes em pacientes com síndromes neurológicas agudas de etiologia viral. |