IDENTIFICAÇÃO E SEQUENCIAMENTO GENÔMICO DE ZIKA VÍRUS EM AMOSTRAS NATURAIS DE MOSQUITOS PROVENIENTES DE VITÓRIA – ESPÍRITO SANTO, BRASIL.
MARIANA CAROLINA DE MORAIS SOBRAL ¹, DUSCHINKA RIBEIRO DUARTE GUEDES¹, MARCELO HENRIQUE DE SANTOS PAIVA¹, LARISSA KROKOVSKY¹, LAÍS CESCHINI MACHADO¹, MARIA ALICE VARJAL DE MELO SANTOS¹, MONICA CRESPO¹, CLAUDIA MARIA FONTES DE OLIVEIRA¹, RICARDO RIBEIRO¹, ORLEI AMARAL CARDOSO¹, ANA LUCIA BARBOSA DE MENEZES¹, ROBERTO COSTA LAPERRIERE JÚNIOR¹, CARLOS FEITOSA LUNA¹, ANDRE SÁ DE OLIVEIRA¹, WALTER LEAL¹, CONSTANCIA FLAVIA JUNQUEIRA AYRES¹, GABRIEL DA LUZ WALLAU¹
1. IAM - Instituto Aggeu Magalhães, 2. UFPE - Universidade Federal de Pernambuco, 3. NVS - Núcleo de Vigilância em Saúde, 4. CVSA - Centro de Vigilância em Saúde Ambiental, 5. SESA - Núcleo Especial de Vigilância Ambiental, 6. IAM - Núcleo de Estatística e Geoprocessamento , 7. UC DAVIS - Departamento de Biologia Celular e Molecular
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O vírus Zika (ZIKV), flavivírus transmitido por mosquitos de diferentes gêneros, foi primeiramente isolado em 1947, em Uganda na África. Inicialmente, mosquitos do gênero Aedes foram considerados como vetores primários de ZIKV no mundo. No entanto, estudos recentes demonstram tanto a competência quanto a circulação de ZIKV em amostras naturais de mosquitos Culex quinquefasciatus. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a circulação de ZIKV em amostras de Aedes aegypti , Aedes taeniorhynchus e Culex quinquefasciatus coletados durante o período epidêmico de ZIKV em Vitória, Espírito Santo. Os mosquitos foram obtidos a partir de diferentes métodos de coleta entre fevereiro e março de 2016 e separados por espécie em pools de até 10 espécimes. As amostras foram submetidas a extração de RNA e detecção de ZIKV através de RT-qPCR. Seis pools de mosquitos foram identificados como positivos: Cx. quinquefasciatus (4) , Ae. aegypti (1) Ae. Taeniorhynchus (1). Dessas amostras, ZIKV provenientes de duas amostras de Cx. quinquefasciatus e uma de Ae. aegypti foram isoladas em células Vero. Estas cepas foram nomeadas de Cxq_ES1, Cxq_ES24 e Aea_ES32. Após a amplificação do genoma de ZIKV das amostras, estas foram submetidas à montagem da biblioteca genômica e posterior sequenciamento de nova geração. O alinhamento destes genomas com outros disponíveis no Genbank revelarou que Cxq_ES24 e Aea_ES32 agruparam com um clado filogenético isolados de ZIKV detectados recentemente no Estado de Pernambuco e no Haiti. Além disso, o genoma de ZIKV Cxq_ES1 agrupou em um clado contendo os principais isolados da epidemia de ZIKVV em 2015 no Brasil. As análises ainda mostraram que as sequencias de ZIKV Cxq_ES24 e Aea_ES32 diferiram em sete e doze polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs), respectivamente, quando comparadas com o genoma de ZIKV proveniente da epidemia de 2015 em PE (KX197192). Devido ao fato da sequência Cxq_ES1 ter agrupado em outro clado, a mesma foi analisada em comparação com o genoma de ZIKV obtido de amostras da PB (KX280026). Este genoma apresentou uma diferença de sete SNPs para este genoma. Sendo assim, o presente trabalho demonstrou a circulação pela primeira vez de ZIKV em mosquitos de campo de diferentes espécies em Vitória, ES. Além disso, este estudo também demonstra a circulação simultânea de variantes de ZIKV em uma mesma cidade do Brasil.