AVALIAÇÃO IN VITRO DO PERFIL DE MORTE CELULAR DE TRYPANOSOMA CRUZI FRENTE À SÉRIE INÉDITA DE TIOSSEMICARBAZONAS
SOPHIA BEZERRA DA SILVA 1, ANA CATARINA CRISTOVÃO1, ALINE CAROLINE DA SILVA SANTOS1, MARIA CAROLINA ACCIOLY BRELAZ DE CASTRO1, DIOGO RODRIGO MAGALHÃES MOREIRA1, ANA CRISTINA LIMA LEITE1, VALÉRIA REGO ALVES PEREIRA1
1. IAM - Instituto Aggeu Magalhães - Fiocruz/PE, 2. PPGIT - Programa de Pós-Graduação em Inovação Terapêutica - UFPE, 3. CAV (UFPE) - Centro Acadêmico de Vitória - UFPE, 4. IGM - Instituto Gonçalo Muniz - Fiocruz/BA, 5. DCF (UFPE) - Departamento de Ciências Farmacêuticas - UFPE
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Na patologia da Doença de Chagas, a imunorregulação, o controle da carga parasitária e o processo inflamatório são aspectos relacionados à morte celular. A morte celular pode ser programada como, por exemplo, pela apoptose, ou pode ocorrer pela necrose com o rompimento da membrana. Os testes para compostos que possam vir a substituir o Benzonidazol (BZN) incluem investigar o perfil de morte celular induzida no parasito. Uma classe de compostos que vem sendo investigada com relação a atividade contra T. cruzi são as tiossemicarbazonas. Assim, foi sintetizada uma série inédita dessa classe (TD-01 a 09), da qual foram selecionados para os ensaios de morte celular os compostos que apresentaram IC 50 para a forma tripomastigota (TD-01, 02, 03, 04, 06 e 09). O objetivo desse trabalho foi avaliar por citometria de fluxo a atuação dos compostos na indução de morte celular parasitária, sendo o estudo realizado primário, analítico, intervencional e experimental. Tripomastigotas foram ressuspensos, tratados com 1x e 2x a IC 50 dos compostos e incubados durante 24h. Após esse período, foram marcados com 7-AAD e anexina V (AV). Os controles foram parasitos não tratados e o BZN. A leitura foi feita em citômetro BD FACSCalibur com 20.000 eventos da região parasitária e os dados expressos como a porcentagem de parasitos em cada quadrante (não corados: vivos, corados com 7-AAD: necrose, corados com AV: apoptose inicial, corados com ambos: apoptose tardia) comparados com o número total de células analisadas. Os resultados foram considerados ao nível de significância de 5%. Os compostos TD-02 a 04 e TD-06 apresentaram indução dos 3 perfis de morte celular, porém as porcentagens para apoptose inicial foram maiores. O TD-01 apresentou porcentagem maior para o perfil apoptótico inicial em detrimento do necrótico. O TD-09 foi o único que apresentou apenas indução do perfil necrótico. Ressalta-se que o comportamento do BZN foi de indução de apoptose tardia e necrose, tendo maior porcentagem para a última. A morte por apoptose inicial leva a um menor processo inflamatório associado, já que não há rompimento da membrana e há rápida fagocitose. É interessante que um fármaco desencadeie esse processo, pois a necrose leva à inflamação devido ao extravasamento do conteúdo celular, acarretando maiores danos teciduais. Levando em consideração que o perfil necrótico pode levar a efeitos adversos, a maioria dos compostos testados induziu apoptose inicial quando comparados aos controles.



Palavras-chaves:  apoptose, bioensaio, necrose, screening de compostos, tiossemicarbazonas