EFEITOS DA DOXICICLINA NA EXPRESSÃO DE MMP-9 E DE MT1-MMP INDUZIDAS NA MIGRAÇÃO IN VITRO DE MACRÓFAGOS INFECTADOS COM Toxoplasma Gondii
BÁRBARA ANDRADE BARCELOS RANGEL 1, AMANDA PEREIRA VASCONCELOS1, IGOR SANTIAGO DE CARVALHO1, RENATO AUGUSTO DAMATTA1, THAÍS RIGUETI BRASIL1, ANDREA CRISTINA VETÖ ARNHOLDT1
1. UENF - Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro
babi.rangel@hotmail.com

A toxoplasmose é uma doença infecciosa causada pelo parasita Toxoplasma gondii , que tem a capacidade de atravessar barreiras biológicas e se situar em regiões imunoprivilegiadas do corpo humano. A travessia promovida pelo parasita pode envolver e alterar a expressão de Metaloproteinases de matriz (MMPs), como a MT1-MMP ( Membrane Type 1-Matrix Metalloproteinase ), MMP9 ( Matrix Metallopeptidase 9 ), moléculas que estão envolvidas na invasão e metástase de vários tipos de câncer. A doxiciclina (DOXY) é um antibiótico derivado de tetraciclina, que tem sido usado em diversos tipos de infecções, entre eles na malária, minorando os danos observados na malária cerebral. A DOXY também tem sido usada em testes pré-clínicos de adenocarcinoma de duodeno, devido a sua capacidade de regular a expressão de metaloproteinases de matriz extracelular. Este trabalho tem por objetivo avaliar os efeitos da DOXY na infecção in vitro de macrófagos murinos com T. gondii e na expressão de MMP-9 e de MT1-MMP induzidas durante esse processo. A viabilidade das células Raw 264.7, a concentração e a proporção ideais após o tratamento com a doxiciclina foram determinadas através do MTT. Macrófagos murinos foram infectados com T. gondii na proporção ideal de 1:1. Após 1h, os parasitos foram retirados e a DOXY foi adicionada ao meio na melhor concentração de 20 ug/ml. Depois de 24h, as células foram fixadas para contagem utilizando a coloração de Giemsa e posteriormente serão marcadas para a avaliação da expressão de MMP- 9 e de MT1-MMP por imunofluorescência. Foi observada uma alteração na quantidade de células e parasitas contados em relação ao controle infectado e não infectado na presença de DOXY, experimento que precisará de repetição. As etapas futuras serão direcionadas para os experimentos in vivo, Imunofluorescência e Citometria. Estamos analisando também a capacidade da DOXY interferir na migração de células infectadas em MATRIGEL™, alterando a sua invasividade.

Instituição de fomento: PIBIC-CNPq



Palavras-chaves:  Doxiciclina, Metaloproteinases, MMP9, MT1-MMP, Toxoplasma gondii