EFEITOS DA DOXICICLINA NA EXPRESSÃO DE MMP-9 E DE MT1-MMP INDUZIDAS NA MIGRAÇÃO IN VITRO DE MACRÓFAGOS INFECTADOS COM Toxoplasma Gondii |
A toxoplasmose é uma doença infecciosa causada pelo parasita Toxoplasma gondii , que tem a capacidade de atravessar barreiras biológicas e se situar em regiões imunoprivilegiadas do corpo humano. A travessia promovida pelo parasita pode envolver e alterar a expressão de Metaloproteinases de matriz (MMPs), como a MT1-MMP ( Membrane Type 1-Matrix Metalloproteinase ), MMP9 ( Matrix Metallopeptidase 9 ), moléculas que estão envolvidas na invasão e metástase de vários tipos de câncer. A doxiciclina (DOXY) é um antibiótico derivado de tetraciclina, que tem sido usado em diversos tipos de infecções, entre eles na malária, minorando os danos observados na malária cerebral. A DOXY também tem sido usada em testes pré-clínicos de adenocarcinoma de duodeno, devido a sua capacidade de regular a expressão de metaloproteinases de matriz extracelular. Este trabalho tem por objetivo avaliar os efeitos da DOXY na infecção in vitro de macrófagos murinos com T. gondii e na expressão de MMP-9 e de MT1-MMP induzidas durante esse processo. A viabilidade das células Raw 264.7, a concentração e a proporção ideais após o tratamento com a doxiciclina foram determinadas através do MTT. Macrófagos murinos foram infectados com T. gondii na proporção ideal de 1:1. Após 1h, os parasitos foram retirados e a DOXY foi adicionada ao meio na melhor concentração de 20 ug/ml. Depois de 24h, as células foram fixadas para contagem utilizando a coloração de Giemsa e posteriormente serão marcadas para a avaliação da expressão de MMP- 9 e de MT1-MMP por imunofluorescência. Foi observada uma alteração na quantidade de células e parasitas contados em relação ao controle infectado e não infectado na presença de DOXY, experimento que precisará de repetição. As etapas futuras serão direcionadas para os experimentos in vivo, Imunofluorescência e Citometria. Estamos analisando também a capacidade da DOXY interferir na migração de células infectadas em MATRIGEL™, alterando a sua invasividade. Instituição de fomento: PIBIC-CNPq |