AVALIAÇÃO DE ALTERAÇÕES MOLECULARES DESENCADEADAS PELA REMODELAGEM LIPÍDICA DA PAREDE DO MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS |
A característica marcante do Mycobacterium tuberculosis ( Mtb ), o agente causador da tuberculose, é sua habilidade em estabelecer uma infecção persistente e evoluir para a tuberculose ativa (TB), mas os mecanismos moleculares relacionados ao desenvolvimento da latência e à evolução para a TB ainda não estão elucidados. Estudos têm demonstrado que os lipídios da parede celular do Mtb têm um papel na indução da resposta imune do hospedeiro e um dos mecanismos de regulação da composição lipídica da parede celular do Mtb envolve o operon mce1. A interrupção deste operon, desencadeada em situações estressantes impostas pelo ambiente granulomatoso, promove uma remodelagem na composição lipídica da parede do bacilo. Os lipídios da parede celular do Mtb interagem com os receptores nucleares ativados por lipídios (RNAL) da célula, levando à modulação da expressão de genes envolvidos na resposta imune durante o processo infeccioso. Esse mecanismo parece permitir ao Mtb estabelecer uma infecção de longo prazo no hospedeiro. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil de expressão gênica in vitro de macrófagos murinos, quando induzidos por lipídios da cepa selvagem e mutante no operon mce1 do Mtb . Para isso, macrófagos RAW 264.7 foram estimuladas in vitro por 72h pelo extrato de lipídios apolares das cepas de Mtb selvagem (WT) e com interrupção no operon Mce1 (∆1). A quantificação de genes de RNALs ( PPAR-γ , TR4 , LXR-α e RAR ) e de genes associados com a resposta inflamatória ( IL-6 , IL-1β , TNF-α ) foi obtida por PCR em tempo real (RT-PCR). O extrato lipídico da cepa Δ1 modulou a expressão dos genes IL-6 , IL-1β e TNF-α em, respectivamente, 19, 1,9 e 4 vezes, com relação aos níveis de expressão observados em macrófagos estimulados pelo extrato lipídico da cepa WT. Adicionalmente, enquanto o extrato lipídico da cepa WT reprimiu a expressão dos receptores nucleares ativados por lipídios: RAR e TR4 com relação ao controle não estimulado, o extrato lipídico da cepa Δ1 restaurou a expressão desses genes. Esses dados mostram que a interrupção do operon mce1 reprime a expressão de genes envolvidos na resposta inflamatória aguda de macrófagos murinos e reestabelece a expressão de RNALs, reconhecidos por seu papel no controle da inflamação, sugerindo que a remodelagem lipídica da parede do Mtb é um mecanismo para modulação da resposta imune do hospedeiro e estabelecimento de infecção a longo prazo. Agência de Fomento: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado da Bahia |