Depleção do proteoma plasmático de camundongos infectados por Schistosoma mansoni para a descoberta de proteínas relacionadas à infecção
GUSTAVO GONÇALVES SILVA ¹, BRUNO MATTEI¹, MAIARA DIAS NASCIMENTO¹, WILLIAM CASTRO BORGES¹
1. UFOP - Programa de pós-graduação em Biotecnologia, Universidade Federal de Ouro Preto, 2. NUPEB - Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, 3. ENUT - Escola de Nutrição, Universidade Federal de Ouro Preto., 4. DCBI - Departamento de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto.
gustavoichbin@gmail.com

A análise do proteoma plasmático de camundongos infectados por S. mansoni pode contribuir para o entendimento da doença no hospedeiro vertebrado. O proteoma plasmático apresenta algumas características intrínsecas como a grande distribuição dinâmica das proteínas. Em consequência, as proteínas mais abundantes dominam consideravelmente esse fluido biológico. A utilização de solvente orgânico para depleção promove uma mudança composicional no proteoma plasmático, portanto pode contribuir na descoberta de proteínas produzidas frente à infecção por S. mansoni . Neste trabalho, por meio de uma abordagem de depleção com Acetonitrila objetivou-se investigar as alterações no plasma utilizando-se de eletroforese e espectrometria de massas. Obteve-se plasma de camundongos Balb/c infectados por 7 semanas com Schistosoma mansoni. Adicionou-se Acetonitrila na concentração final de 60%, determinando a concentração de proteínas por BCA antes e depois da depleção. A análise composicional do proteoma plasmático ocorreu por meio da avaliação comparativa do perfil eletroforético e sequenciamento de peptídeos em larga escala. Os resultados de eletroforese revelaram um perfil particular em amostras que foram depletadas, exibindo na coloração com nitrato de prata, enriquecimento de bandas de baixa massa molecular. Em paralelo, observou-se depleção de bandas referentes a proteínas de alta massa. Os resultados de espectrometria confirmaram mudanças significativas quanto à abundância proteica, distribuição dinâmica e identificação de proteínas. Ao todo, 597 moléculas foram identificadas em amostras infectadas não depletadas e 228 em amostras depletadas. Houve uma redução de 2 ordens de magnitudes na distribuição dinâmica após o uso de Acetonitrila. O emprego de depleção por acetonitrila em amostras de animais infectados por S. mansoni pode auxiliar na identificação de biomarcadores relacionados à esquistossomose, a partir do enriquecimento de proteínas do hospedeiro de menor abundância produzidas frente à infecção. Suporte financeiro e agradecimento: UFOP/CAPES/ Fapemig.