RASTREIO DE PEPTÍDEO VEGETAL PRESENTE EM SEMENTES DE 'Sucupira branca' (Pterodon emarginatus) COM AÇÃO ANTI-BIOFILMES PATOGÊNICOS |
A saúde pública enfrenta muitos problemas em relação ao tratamento de pacientes com infecções bacterianas, e pode-se ressaltar dois agravantes dessa situação: bactérias multirresistentes e cepas formadoras de biofilme. Os biofilmes contribuem para o aumento da resistência bacteriana pois, além de fornecer um cerne de polissacarídeos que dificulta a ação dos medicamentos, ainda permite a comunicação gênica entres as colônias. Com o aumento da ineficácia dos antibióticos frente essas dificuldades, a busca por tratamentos alternativos cresceu, com ênfase nas pesquisas aos peptídeos de origem vegetal. Com isso, o objetivo deste trabalho foi a investigação do efeito de frações proteicas de sementes de Pterodon emarginatus , conhecidas como Sucupira Branca, na formação de biofilme in vitro e no desprendimento de bactérias patogênicas gram-positivas do biofilme. O extrato bruto foi separado por cromatografia utilizando a coluna Blue-Sepharose no sistema AKTA pure, previamente equilibrada com tampão fosfato 0,02 M, pH 7,2. As eluições de proteína foram realizadas utilizando NaCl 1M. As amostras dos picos foram quantificadas por Bradford e visualizadas por SDS-PAGE. A triagem de biofilme foi realizada por placa de microtitulação de 96 poços usando espécies de Staphylococcus (ATCC 80958 e ATCC 35984) cultivadas em BHI 4% de glicose a 37 ° C por 18 horas, conforme descrito por Stepanovic et al . O cromatograma resultou em dois picos não retidos (PNR) e um pico retido (PR), e o SDS-PAGE indicou a presença de diferentes perfis de proteína/peptídeo entre PNR e PR. O rastreio da atividade biológica revelou ação anti-biofilmes de Staphylococcus para PR a 100 µg.mL-1, induzindo uma redução de 51% e 95% na aderência de colônias de S. aureus (ATCC 80958) e S. epidermidis (ATCC 35984), respectivamente. E ainda, também foi comprovado uma significante destruição de biofilmes pré-formados por 24 h, variando de 78% a 90% em duas espécies de Staphylococcus . Além disso, as frações proteicas de P. emarginatus não causaram hemólise nas células vermelhas do sangue humano. Sendo assim, outras cepas bacterianas serão utilizadas em futuros testes a fim de verificar a eficácia da molécula contra estas. |